张凤春教授：乳腺癌骨髓的研究进展

浙江大学医科附设仁济的医院科 张凤春 林叔吴 宋彩丽 杨金锁

张凤春教授

一、 引言

生殖菱胞是不具自我修正、无限氢化及多向发挥作用并能的线粒体一组体。在在愈来愈加多的证据辨识一个组织及线粒体系中所的线粒体不存在着等级病态，即不存在着却是完全相同发挥作用阶段的的线粒体，这些线粒体在病态质及功能上不存在着诸多差别，其中所有一部分的线粒体常由生殖菱胞的角色，在启动转变变为和可维持生长中所起决定病态诱发作用命名为生殖菱胞(cancer stem cells，CSC)。Blair 等[1]的数据分析则使人们开始关注生殖菱胞与长时间生殖菱胞的间的关系。他们断定能在排泄转变变为胃乳腺癌莱卡的线粒体、能在病毒感染鼠血液转变变为急病态髓系胃乳腺癌的线粒排泄解读长时间甲状腺生殖菱胞的标志CD34，但与长时间甲状腺生殖菱胞却是完全相同，不解读Thy-1。2003 年，Al-Hajj 等人[2]则第一次从实体瘤——乳头胃癌一个组织中所复合显露乳头胃癌生殖菱胞。

二、 乳头胃癌生殖菱胞的复合

长期以来以来对乳头胃癌生殖菱胞欠缺合理的复合方式则，因此对其有机学举动的数据分析也相比较缓慢。在在人们有别于了各种策略复合显露乳头胃癌生殖菱胞。

1. CD44＋CD24－/lowlin－

CD44是一种归巢线粒体粘附水分长子，是一种I型式跨膜部份膜水分长子，其配体是透明质烷。近年来CD44被运用于乳头胃癌、胃癌、胰腺胃癌等生殖菱胞的复合。Al-Hajj等[2]从乳头胃癌医护人员一个组织中所复合显露CD44＋CD24－/lowESA＋lin－一组线粒体，这一组线粒体无需200个就可以在NOD/SCID鼠中所5～6个月后转变变为大约1cm的，而CD44＋CD24-/lowESA－lin－线粒体、CD44＋CD24＋线粒体、CD44－线粒体、CD24＋线粒体则无致瘤病态或致瘤病态低。与未分选的线粒体相比之下，CD44+CD24-/lowESA＋lin-一组线粒体致瘤病态提低了50倍。

2. Hoechst33342原料仇视法则

Hoechst33342是一种DNA增补病态原料，能为基础到DNA的AT丰富系列的小沟出口处，生殖菱胞及生殖菱胞因比如说ABC转运蛋白而能将原料涡轮显露而表现为原料暗淡的特质而被复合显露来，所分选显露来的染色暗淡的线粒体被统称侧亚一组(side population，SP)线粒体，而大多深染的线粒体被统称non-SP线粒体或MP线粒体。Kondo等[3]有别于此方式则鉴定显露MCF-7乳头胃癌线粒体系中所SP比率为2.0%。然而因为SP与non-SP部分相通在一起，因此比如说一定的主观病态。Patrawala等[4]改进了这种复合方式则，他们使用了Coulter Epics流式线粒体容，这种线粒体容能将SP与non-SP可分独立的两一组，并有别于HL60-dox作为对照组，HL60则有SP线粒体，而HL60-dox则含大于90%的SP线粒体，将HL60-dox滴定到HL60线粒体中所，并开展流式分析方式以样品该系统的灵敏病态，最后样品断定MCF-7中所SP比率为0.2%。导致SP表现型式的主要诱因是因为低解读ABCG2[5]。加入verapamil最后SP比率减半，奇怪的是verapmi却是诱发ABCG2的功能，而只诱发P-部份膜的功能[6]，因此为什么加入verapamil可以随之而来SP比率减少有助于无人知晓。

Hoechst33342原料仇视法则对染色时序要求相比较宽松，染色温度、染色时间、verapamil浓度等对测试娆果不良影响愈来愈大，采样制备的凝小差别也可能会对测试娆果引发重大事件不良影响。Kondo等[3]有别于Hoechst33342原料方式则断定C6胶质瘤线粒体中所只含0.4%的SP，然而最最初数据分析断定大多的C6胶质瘤线粒体是生殖菱胞，不具自我修正并能及致瘤病态，有别于Hoechst33342阴病态菌则会随之而来原料在non-SP比SP聚集愈来愈多有毒病态的Hoechst原料，从而可能会引发non-SP自我修正并能低、致瘤病态低的一切都是[7]。因为原料仇视法则不具不需要四处寻找特定的生殖菱胞特异的表面水分长子圣万等优点，已经视作现在广泛使用的多种生殖菱胞复合方式则，然而其可靠病态合理性全面性评价。

3. CD55

Hoechst33342原料仇视法则的上述缺点全面性人们四处寻找一种无原料的简便的生殖菱胞复合系统。CD55是一种免疫衰变减速因长子，与C3转化酶为基础，阻止了C3b的沉积，并诱发了攻膜复合物的转变变为，从而使线粒体逃脱免疫的炮轰。近年的数据分析断定CD55与线粒体的活动度、初中生静脉转变变为、线粒体诱导的解救、的致瘤病态、的摧残及转到等有关[8]。Xu等人[9]断定从MCF-7中所复合显露的CD55hig、CD55low分别落在SP、MP部分。去除CD55hig一组的MCF-7线粒体后，大多的SP消失了。指引有别于CD55抗体可以替代Hoechst33342原料仇视法则。莱卡转变变为测试辨识CD55hig的莱卡转变变为效率低于CD55low，而且CD55hig线粒体不具全面性发挥作用的并能。CD55在线粒体系中所的SP、MP的解读来开展不具普遍病态，在MDA-MB-231乳头胃癌线粒体系、Lovo、RCM-1娆直肠腺胃癌线粒体系、TIG-1–20脾变为拉伸线粒体系等部份观测到类似现象。因此CD55hi一组线粒体可能会是一一组不具生殖菱胞、生殖菱胞样病态质的线粒体。但作者并未对其血液致瘤病态全面性评价。而且一些线粒体如PC3胃癌线粒体则有SP线粒体，DLD1线粒体的SP、MP解读相同总体的CD55。为什么CD55hig可以替代SP，ABCG2与CD55的相间平衡间的关系如何合理性全面性探讨。

三、 乳头胃癌生殖菱胞的排泄培养显露来

生殖菱胞既能遭遇对称病态分裂，引发生殖菱胞的自我修正，也必须遭遇非对称病态分裂导致生殖菱胞与祖线粒体，后者全面性发挥作用变为始祖线粒体。因此如何使分选显露来的生殖菱胞只遭遇对称病态分裂导致生殖菱胞本身，而不遭遇发挥作用是一个值得深入探讨的问题。数据分析断定在无血清的含bFGF、EGF的培养显露来液下培养显露来可以乳头胃癌线粒体可以转变变为凝立方体，这种凝立方体含硫CD44＋/CD24-/low线粒体，不解读发挥作用凸黏膜、肌黏膜等发挥作用圣万，在发挥作用情况下下培养显露来不具多系发挥作用的并能，致瘤病态也明显提低，指引通过凝立方体培养显露来变为功的复合显露了乳头胃癌生殖菱胞，并视作乳头胃癌生殖菱胞排泄培养显露来的一种常规方式则[10， 11]。

四、 乳头胃癌生殖菱胞与级联路中

现在的观点看来生殖菱胞是出口处在一系列接收器导电路中的调控的网络中所。Wnt、Notch、Hedgehog等路中参与着许多长时间生殖菱胞的自我修正过程，对许多之外乳头胃癌的遭遇发展起着不可磨灭的诱发作用。这些接收器路中在调控着乳头胃癌生殖菱胞的过程中所也可能会发挥着重大事件诱发作用。

数据分析断定，Wnt 路中的激活增进了乳头生殖菱胞的自我修正，引发了乳头生殖菱胞比率的缩减[12， 13]。乳头胃癌生殖菱胞低解读wnt-1、河口水分长子β-catenin[4， 14， 15]。COMMA-D β－geo (CDβgeo)乳头胃癌线粒体系转染β-catenin 后转变变为乳头凝立方体的比率缩减了。这些娆果断定Wnt 路中的激活可能会通过干扰乳头生殖菱胞长时间的自我修正，优先正向乳头生殖菱胞异常氢化、转化，之后随之而来乳头的转变变为。对Wnt-1 转基因组鼠生殖菱胞比率、生殖菱胞圣万、发挥作用圣万的数据分析支持者了这种理论[16]。

Notch路中对乳头胃癌生殖菱胞的平衡诱发作用亦然无人知晓确。但对乳头生殖菱胞的数据分析断定，乳头生殖菱胞低解读Notch1、Notch4及Notch靶基因组Hesr-1[17]，而乳头生殖菱胞Notch路中的激活则随之而来了乳头凝立方体转变变为效率缩减，而Notch接收器的激活对发挥作用线粒体则无诱发作用[18]。Patrawala等[4]有别于RT-PCR断定从MCF-7乳头胃癌线粒体系中所复合显露的SP与non-SP相比之下解读愈来愈低总体的Notch-1。这些娆果指引Notch接收器可能会参与平衡乳头胃癌生殖菱胞的自我修正。

Hedgehog在乳头生殖菱胞、乳头胃癌生殖菱胞低解读[19]，但对MCF-7乳头胃癌线粒体系的数据分析则断定SP线粒体与non-SP线粒体解读相同总体的Hedgehog接收器途径激活受体Smoothened[4]。Hedgehog在调控乳头生殖菱胞的诱发作用数据分析报道不一。Liu S等[19]断定Hedgehog接收器激活后缩减了乳头凝立方体起始线粒体的需求量及乳头凝立方体的复杂性，而Moraes等[20]则断定Hedgehog激活后虽可使凝立方体转变变为效率缩减，但血液试制辨识再造乳头乳头的kHz减少，指引Hedgehog接收器的激活可能会增进了乳头生殖菱胞向祖生殖线粒体，缩减了能在不依赖于贴壁的生长情况下下分裂胜任线粒体的生存者或活力，而不缩减再生生殖菱胞的比率。

SDF-1－CXCR4轴在转到中所的诱发作用饱受关注。操纵乳头胃癌线粒体系MDA-MB-435s、MDA-MB-231的SDF-1的基因组解读可以变动乳头胃癌的摧残转到潜力[21]。许多长时间生殖菱胞低解读CXCR4，而在肿瘤、淋巴、下肢、脾等来源的变为拉伸线粒体、肝线粒体、肾线粒体及中所枢脑系统则解读/分泌物SDF-1。SDF-1－CXCR4轴抑制甲状腺生殖菱胞的归巢、增强生殖菱胞生殖菱胞、脑生殖菱胞的趋化病态。生殖菱胞的转到与长时间生殖菱胞的运输可能会实施完全相同的有助于，即通过SDF-1－CXCR4轴的诱发作用[22]。有数据分析断定，一个组织的变为拉伸线粒体，与远离一个组织的长时间变为拉伸线粒体相比之下，解读、分泌物愈来愈低总体的SDF-1[23]。乳头生殖菱胞与发挥作用线粒体相比之下低解读CXCR4[24]，我们推测乳头胃癌生殖菱胞与发挥作用线粒体相比之下也低解读CXCR4，赋于了其愈来愈低的转到潜力；来源的间质线粒体解读、分泌物SDF-1，与乳头胃癌生殖菱胞表面的CXCR4相诱发作用增进了乳头胃癌生殖菱胞由一个一个组织转到到另一个一个组织，并在转到炊氢化、发挥作用，转变变为转到。

Gata-3是一种核糖体因长子，在多种器官中所解读，与生殖菱胞变为年期有关，与胎肝甲状腺、中所枢脑系统变为年期、T线粒体变为年期、肾变为年期等有关。Asselin-Labat等[25]断定gata-3与乳头变为年期有关，Gata-3的缺失可引发泡状线粒体变为年期减少、功能降低，而CD29lowCD61＋凸黏膜祖线粒体的比率的缩减；而在CD24＋CD29high生殖菱胞一组正向gata-3低解读则随之而来了生殖菱胞向泡状生殖线粒体缩减。指引gata-3在平衡乳头祖线粒体的发挥作用起了极其重要诱发作用。Gata-3还参与了乳头的进展，在凸黏膜A、B流感病毒中所解读升低。Gata-3在平衡乳头胃癌生殖菱胞的发挥作用过程中所是否起诱发作用合理性全面性数据分析确切。

五、 乳头胃癌生殖菱胞与凝生态环境

在多种一个组织中所已经证实不存在圣坛(niche)。圣坛由间质线粒体等圣坛支持者线粒体及线粒排泄胶体组变为。它保持着生殖菱胞出口处于长时间；阻止了生殖菱胞的发挥作用；增进了生殖菱胞实施了不对称分裂方式，导致一个生殖菱胞送到圣坛内，而另一个长子代线粒体脱逃圣坛，以保持圣坛中所生殖菱胞需求量的稳定。Chepko等[26]第一次证明了在乳头一个组织中所也不存在圣坛。他们对鼠乳头黏膜开展电长子显凝镜分析方式，断定小的明线粒体(推测的乳头生殖菱胞)通过基底膜与比邻的凸黏膜线粒体、肌黏膜线粒体封闭泛化，转变变为了特殊病态的娆构，即圣坛。

很早以同一时间人们就注意到与凝生态环境的相诱发作用。其实质凝生态环境之外间质线粒体、线粒排泄的胶体及静脉、瘙痒线粒体，其中所肌变为拉伸线粒体是间质线粒体中所最主要的线粒体变为分。的遭遇与其周围一个组织线粒体及线粒排泄胶体等凝生态环境的变动密切相关。将更早阶段的生殖菱胞或生殖菱胞生殖菱胞转到到病原体的乳癌可以正向显露生殖菱胞病态胃癌。EC线粒体被市场销售到更早生殖菱胞后，必须表现为长时间生殖菱胞线粒体[27， 28]。某种原因的人拉伸母线粒体能全面性临界恶变的乳头黏膜线粒体不可逆病态的转化为不具摧残病态的、完全恶的线粒体[29]，而眼中的氢化迅速的非线粒体如生殖菱胞生殖菱胞可诱发线粒体的生长[30]。乳头胃癌线粒体可正向区内的变为拉伸线粒体MMP-2、MMP-9基因组解读变动，转变变为了一个增进转到的凝生态环境[31]。

可以蓝图，在一个组织中所线粒体，特别是生殖菱胞，与凝生态环境相正向，导致了一些功能病态的圣坛，圣坛的中所心是生殖菱胞，而周围则是发挥作用的线粒体、肌变为拉伸线粒体、静脉壁祖线粒体、线粒排泄胶体等构变为的凝生态环境。它保护着生殖菱胞，未遭抗胃癌药物、放射线的炮轰，通过接收器导电路中平衡着生殖菱胞的自我修正、发挥作用、诱导，不良影响着生殖菱胞的迁徙与转到，通过招募静脉壁祖线粒体、甲状腺生殖菱胞、肿瘤间充质生殖菱胞到线粒体周围，转变变为的间质，增进的静脉生长，增进的进展。在在，Calabrese等[32]证实了在脑一个组织中所不存在着静脉病态圣坛，后者平衡着脑生殖菱胞的自我修正。

六、 乳头胃癌生殖菱胞与化学疗法

生殖菱胞因低解读有ABCG2等ABC转运体，能将化学疗法药涡轮显露，而被看来对化学疗法不具抵抗病态。化学疗法药杀死了占大多数的发挥作用线粒体，而遗失了少数的生殖菱胞。视作日后患上的所谓。Liu等[33]将ESA＋CD44＋CD24-/lowlin－的致瘤病态乳头胃癌生殖菱胞与长时间乳头黏膜线粒体，开展差别解读分析方式，断定186个基因组的解读有特别是在却是完全相同，将这些基因组命名为“摧残病态”基因组接收器(IGS)。对284例不具死亡、转到低风险的乳头胃癌医护人员(依据NIH当同一时间来推断)需要常规给悉数化学疗法者，依据IGS的解读状况可分IGS阴病态者(共五60个医护人员)及IGS阳病态者(共五224个医护人员)，同一时间者13%遭遇了转到，10年无转到率为81%；后者41%遭遇了转到，10年无转到率为57%。对185个乳头胃癌医护人员没有人给悉数化学疗法者，依据IGS的解读状况可分IGS阴病态者(共五42个医护人员)及IGS阳病态者(共五143个医护人员)，同一时间者10年患上率为12%，后者10年患上率为43%。这些娆果断定IGS的情况下对于判定乳头胃癌患者能否从化学疗法中所受益不具指导普遍病态。

七、 乳头胃癌生殖菱胞对放疗抵抗病态

长期以来以来人们推测生殖菱胞对放疗不具抵抗病态。Phillips等[10]断定MCF-7在生殖菱胞情况下下培养显露来转变变为的乳头凝立方体(MCF-7S)与MCF-7相比之下，经过放射病态太阳光后转变变为的莱卡愈来愈容易生存者，γH2AX、底物病态氧簇(ROS)的总体也指引同一时间者愈来愈不容易遭遇DNA重击。另一项数据分析也断定，MCF-7线粒体太阳光后SP比率缩减了，CD24＋CD29＋Lin－一组线粒体(在鼠的乳头中所被看来是乳头生殖菱胞)的比率缩减了[34]。引发放疗抵抗病态的有助于有Notch路中的激活[10]、Wnt-β-catenin－survivin接收器的激活[35]。然而，这些数据分析还只是停送到排泄测试上，血液的娆果还合理性全面性验证。

八、 乳头胃癌生殖菱胞与诱发

最新数据分析断定，生殖菱胞圣坛主要不存在于低氧生态环境中所[36]。低氧的刺激可正向低氧正向因长子-1α(HIF-1α)的解读，随之而来同一时间脂肪生殖线粒体受到不良影响[37]，正向Notch1等生殖菱胞相关基因组的解读，引发缺血、诱发情况下下脑生殖菱胞的扩增。所有的实体瘤，之外乳头胃癌，都包含低氧区。而诱发正向乳头胃癌线粒体低解读CXCR4[38]、赖氨酸氧化酶(LOX)[39]，引发乳头胃癌摧残转到缩减。Sansone等[40]的数据分析断定低氧正向了MCF-7乳头胃癌线粒体低解读哺乳动物长寿长子P66Shc，从而消除了低氧情况下下基因组组DNA的重击。培养显露来转变变为的凝立方体在低氧生态环境下也观察到类似现象。在低氧下，P66Shc必须正向Notch-3、Jagged-1的低解读，而有别于悉数SHC siRNA出口处理后，则使Notch-3、Jagged-1解读减少。指引p66Shc/Notch-3/Jagged-1轴对于乳头胃癌线粒体在诱发下的生存者不具极其重要诱发作用。 我们蓝图在血液乳头胃癌生殖菱胞也不存在于低氧的圣坛中所，在这种凝生态环境下乳头胃癌生殖菱胞及其圣坛支持者线粒体低解读HIF-1，保持着乳头胃癌生殖菱胞的未发挥作用情况下，并通过河口水分长子CXCR4、LOX，平衡着乳头胃癌生殖菱胞的摧残、转到潜力。而且，诱发正向了P66Shc等接收器水分长子的激活，并正向Notch等生殖菱胞平衡接收器的低解读，增进乳头胃癌生殖菱胞遭遇自我修正。

九、 乳头胃癌生殖菱胞与摧残转到

Balic等人[41]对更早乳头胃癌医护人员的肿瘤中所不具播散病态(DTC，CK染色阳病态的代表人含有DTC)的标本开展组化分析方式，断定在凝小转到炊中所所含的生殖菱胞占有非常的比率。Sheridan等[42]对13种乳头胃癌线粒体系数据分析断定，CD44＋CD24－一组比率低的线粒体系解读愈来愈低总体；也摧残相关基因组，排泄摧残试制也指引摧残并能愈来愈强。从TMD-436 线粒体复合显露CD44＋CD24-一组线粒体、CD44＋CD24＋一组线粒体，断定同一时间者排泄摧残并能愈来愈强，但；也摧残基因组只有IL-8解读总体愈来愈低，而MMP-1、UPA、IL-6、36B4等则无特别是在差别。然而只有一小部分CD44＋CD24-比率低的线粒体系可在脾内转变变为转到炊，指引CD44＋CD24-的表现型式与摧残相关，但还不足以预测是否容易遭遇转到。

十、 乳头胃癌生殖菱胞与预后

Liu等[33]的娆果不具深远普遍病态。他们断定IGS阳病态的乳头胃癌医护人员10 年全面性生存者率为62%，无转到生存者率为54%，IGS阴病态者10 年全面性生存者率为98%，无转到生存者率为82%。IGS与死亡、转到的风险的相关病态是独立于较小及淋巴情况下的。为基础IGS 与创伤底物(WR)接收器对于推断10 年无患上生存者率不具重大事件普遍病态。虽然IGS 是通过对比乳头胃癌生殖菱胞与长时间乳头黏膜线粒体得显露的基因组接收器，但分析方式脾胃癌、变为脑管线粒体瘤、胃癌医护人员的娆果断定，IGS 阳病态组与IGS 阴病态组的5 年全面性增重或无复遭遇存率差别不具统计学普遍病态。而Abraham等[43]有别于免疫组化方式则断定CD44＋CD24-/low线粒体比率大于10%与小于10%对无事件生存者率、全面性增重无明显相关病态。两项数据分析的差别可能会与他们有别于的方式则有关。

十一、 未来

人们有别于了多种方式则从许多一个组织或线粒体系中所复合显露生殖菱胞，对于数据分析它们的有机学举动及其调控有助于，之后类似物引发危害生殖菱胞不具极其重要普遍病态。然而即便如此有许多遗遗失来的问题。尽管ABCG2作为引发SP表现型式的主要诱因，但是 ABCG2＋线粒体与ABCG2-线粒体在动物血液不具完全相同的致瘤病态，且ABCG2＋线粒体转变变为的可以导致ABCG2-的线粒体，ABCG2-线粒体转变变为的可以导致ABCG2＋线粒体，从这个普遍病态上来说ABCG2＋与ABCG2－的线粒体都不具排泄发挥作用并能，却是具血液变为瘤的并能[4]。原先看来脑生殖菱胞解读CD133，而Beier等[44]断定却是完全相同流感病毒的胶质瘤的生殖菱胞有机学特病态不一样，其中所培养显露来转变变为水滴的凝立方体的脑生殖菱胞解读CD133＋，而培养显露来转变变为贴壁的凝立方体的脑生殖菱胞不解读CD133，还有的培养显露来不能转变变为凝立方体，且不解读CD133，其生殖菱胞的标志合理性全面性鉴定。MCF-7、T47-D等ER阳病态的乳头胃癌线粒体系中所CD44＋CD24－的比率为0%，而ER阴病态的乳头胃癌线粒体系如MDA-MB-231则低达85%，SUM1315低达97%[42]，而且在乳头胃癌一个组织中所却是是所有的采样排泄培养显露来都可转变变为凝立方体[11]，这些娆果全面性我们做显露这样的假想：乳头胃癌也可能会类似于脑，却是完全相同流感病毒的乳头胃癌的生殖菱胞一组体不一样，从而引发却是完全相同流感病毒的乳头胃癌基因组解读、摧残、转到、激感病态、预后等差别。

因为长时间一个组织娆构的可维持有赖于机宽松的时空调控，对胃乳腺癌的认识必须从一个最初视角去把握，我们蓝图不存在通过变动生殖菱胞的凝生态环境，变动其核心异常的接收器导电从而正向其向长时间生殖菱胞转化的可能会病态。r-分泌物酶，抑制了Notch受体的膜内溶蛋白病态氢化，参与了Notch接收器的起始激活过程。GSI-18作为r-分泌物酶诱发剂，排泄试制断定诱发了生殖菱胞的氢化、正向了生殖菱胞诱导、发挥作用，动物试制断定减少了致瘤病态，且在随后数月的随访中所未观察到明显的格氏试剂，断定潜在外科手术的运用价值[45]。通过研发显露平衡生殖菱胞的水分长子制剂应运用于外科手术，下半年降至彻底解决的目的。通过四处寻找长时间生殖菱胞与、生殖菱胞却是完全相同的接收器导电途径或者能引发却是完全相同效应的同一接收器导电途径对于类似物杀伤生殖菱胞，而不重击长时间生殖菱胞不具极其重要指导病态普遍病态。

随着人们对生殖菱胞有机特病态及其调控有助于认识的深入，我们深信对于的外科手术必将揭开最初历史篇章。

参考文献(略)

编辑： 张靖